Skip to content

gruźlica kości czy jest zaraźliwa

3 miesiące ago

596 words

Transformacja, hamowanie i właściwości przekazywania sygnału przez kinazę tyrozynową fuzyjną utworzoną przez Fip1-podobne (FIP1L1) i pochodzący z płytek krwi czynnik wzrostu receptora . (PDGFR.). Panel A pokazuje konstrukcje retrowirusowe użyte w badaniu. MSCV oznacza mysi wirus z komórek macierzystych, wewnętrzne miejsce rybosomalne IRES, wzmocnione białko zielonej fluorescencji EGFP, długie końcowe wydłużenie LTR i FIP FIP1L1-PDGFR.. Gwiazda wskazuje pozycję mutacji. W panelu B, komórki Ba / F3 retrowirusowo transdukowane tymi konstruktami hodowano w nieobecności lub w obecności interleukiny-3, a ich średni wzrost (. SD) rejestrowano przez okres trzech dni. Panel C pokazuje krzywe dawka-odpowiedź i komórkowe stężenie hamujące 50% (IC50) imatinibu dla komórek Ba / F3 eksprymujących FIP1L1-PDGFR., FIP1L1-PDGFR. z mutacją T674I lub BCR-ABL. IC50 wynosiło 3,2 nM dla FIP1L1-PDGFR., 582 nM dla BCR-ABL i 7498 nM dla FIP1L1-PDGFR. T674I. Panele D, E, F i G pokazują stan fosforylacji PDGFR. i STAT5 w komórkach Ba / F3 eksprymujących typ dzikiego lub zmutowany (T674I) FIP1L1-PDGFR.. Panele D i F wykazują fosforylację PDGFR. wykrytą przeciwciałem antyfosfotyrozynowym lub przeciwciałem anty-PDGFR. (Kontrola) po immunoprecypitacji. Panele E i G pokazują fosforylację STAT5 wykrytą przeciwciałem swoistym dla antyfosfo-STAT5 lub przeciwciałem anty-STAT5 (kontrola) z użyciem lizatów pełnokomórkowych. Ekspresja FIP1L1-PDGFR. stransformowała mysią hematopoetyczną linię komórkową Ba / F3 do niezależnego wzrostu interleukiny-3 (Figura 5B) i była konstytutywnie fosforylowana tyrozyną w tych komórkach (Figura 5D). Delecja cząstki FIP1L1 (aminokwasy 4 do 233) znosiła ten typ wzrostu, wskazując, że ta część białka fuzyjnego była niezbędna do aktywacji chimerycznej kinazy. Dalsza analiza mutacyjna wykazała, że pierwsze 29 aminokwasów FIP1L1 (kodowanego przez ekson 1) było konieczne i wystarczające do aktywacji domeny kinazy PDGFR. (Figura 5B). Analiza statusu fosforylacji ERK1 lub ERK2 i STAT5 wskazała, że STAT5, ale nie ERK, był dalszym celem dla FIP1L1-PDGFR. (Figura 5E i dane nie pokazane).
Hamowanie aktywności kinazy FIP1L1-PDGFR. i oporności na imatinib
Aby potwierdzić, że FIP1L1-PDGFR. był celem imatinibu, przetestowaliśmy działanie imatinibu na wzrost komórek Ba / F3 eksprymujących FIP1L1-PDGFR. lub FIP1L1-PDGFR. niosących mutację T674I (Figura 5C). Komórki Ba / F3 eksprymujące FIP1L1-PDGFR. były skutecznie hamowane przez znacznie niższe stężenia imatinibu niż komórki Ba / F3 eksprymujące BCR-ABL. Stężenie imatinibu wymagane do zahamowania komórek transformowanych przez FIP1L1-PDGFR. o 50 procent (IC50) wynosiło 3,2 nM, podczas gdy IC50 dla BCR-ABL wynosiło 582 nM.23 Dane te wskazują, że FIP1L1-PDGFR. jest bardziej wrażliwy na hamowanie przez imatynib niż to BCR-ABL i koreluje z ustaleniami, że skuteczna dawka imatynibu jest mniejsza u pacjentów z zespołem hipereozynofilowym (100 mg na dzień) niż u pacjentów z CML dodatnim pod względem BCR-ABL (300 do 400 mg na dobę). W porównaniu z komórkami Ba / F3 eksprymującymi FIP1L1-PDGFR. dzikiego typu, komórki Ba / F3 wyrażające mutanta FIP1L1-PDGFR. T674I były ponad 1000 razy odporniejsze na imatynib, z komórkowym IC50 7498 nM (Figura 5C).
Zgodnie z tymi odkryciami, imatinib hamował fosforylację tyrozyny FIP1L1-PDGFR. i jej dalszy docelowy STAT5 przy IC50 około 5 nM (odpowiednio Figura 5D i Figura 5E), podczas gdy hamowanie zmutowanego T674I wymagało stężenia imatinibu, które wynosiły co najmniej 1000 razy tak wysokie (odpowiednio 10 000 i 5000 nM) (Figura 5F i Figura 5G)
[hasła pokrewne: tk miednicy, korona porcelanowa na metalu, usg pluc ]
[więcej w: przychodnia zdrowie kondratowicza, womp gdańsk, znieczulenie nasiękowe ]

0 thoughts on “gruźlica kości czy jest zaraźliwa”