Skip to content

Kliniczne spektrum otyłości i mutacji w genie receptora melanokortyny 4 ad

4 miesiące ago

488 words

Scharakteryzowaliśmy również funkcję in vitro zmutowanych receptorów i zbadaliśmy związki między fenotypami molekularnymi i klinicznymi. Metody
Przedmioty
Pacjenci z ciężką otyłością o wczesnym początku (przed 10 rokiem życia) kwalifikowali się do włączenia do badania Genetyki otyłości (GOOS) i określani są jako probandy. Zrekrutowaliśmy 750 osób. Wyniki odchylenia standardowego dla wskaźnika masy ciała (waga w kilogramach podzielona przez kwadrat wysokości w metrach) zostały obliczone na podstawie danych referencyjnych z populacji Wielkiej Brytanii.20 Wśród probantów średnia (. SD) wynik odchylenia dla wskaźnika masy ciała wynosił 4,2 . 0,8. Do tej pory zbadano pierwsze 500 niepowiązanych probandów pod względem mutacji w MC4R. Pacjenci z mutacjami w MC4R i ich krewnymi zostali zaproszeni do Wellcome Trust Clinical Research Facility w Addenbrooke s Hospital, Cambridge, Wielka Brytania.
Wszystkie badania zostały zatwierdzone przez wielorządną komisję etyki w Anglii i Oksfordzie. Badania kliniczne zostały przeprowadzone po zatwierdzeniu przez lokalną regionalną komisję etyczną Cambridge. Każdy podmiot lub jego rodzic w przypadku dzieci w wieku poniżej 16 lat wyraził pisemną świadomą zgodę (zgoda została uzyskana od samych nieletnich). Wszystkie badania kliniczne przeprowadzono zgodnie z zasadami Deklaracji Helsińskiej.
Wykrywanie mutacji i genotypowania
Genomowy DNA wyizolowano z limfocytów pełnej krwi, a region kodujący genu MC4R zamplifikowano przez reakcję łańcuchową polimerazy i zsekwencjonowano, jak opisano uprzednio. Aby określić częstotliwość alleliczną, określiliśmy sekwencję MC4R w 100 allelach od osobników z Zjednoczone Królestwo, które zostały losowo wybrane z lokalnej kohorty opartej na populacji
Badania funkcji mutanta
Zmutowane (normalne) i zmutowane MC4Rs klonowano do ssaczego wektora ekspresyjnego pcDNA3 (Invitrogen), jak opisano wcześniej17 i przejściowo transfekowano do komórek HEK293 z reporterem lucyferazy pod kontrolą promotora, który reagował na cykliczne AMP (cAMP), 22 zgodnie z protokołami producenta (Fugene Reagent, Roche Diagnostics). Wszystkie transfekcje obejmowały plazmid pRL-CMV (Promega), który konstytutywnie eksprymuje lucyferazę Renilla i kontrole pod kątem skuteczności transfekcji. Komórki pozbawiono surowicy i dodano różne stężenia hormonu stymulującego melanocyty (Bachem). Po zebraniu komórek określano aktywność lucyferazy stosując układ do oznaczania lucyferazy (Promega). Aktywacja MC4R zwiększa wewnątrzkomórkowy cAMP, który stymuluje ekspresję lucyferazy. Każdy eksperyment przeprowadzono czterokrotnie; wartości podano jako średnie . SE. Dane analizowano, a krzywe wyposażano w oprogramowanie Origin (OriginLab).
Skład ciała, wzrost i równowaga energetyczna
Przeprowadzono antropometrię i absorpcjometrię rentgenowską o podwójnej energii, w celu określenia składu ciała, zgodnie z wcześniejszym opisem17. Gęstość mineralną kości z punktów obliczono przy użyciu zestawu danych z trzeciego badania dotyczącego badania stanu zdrowia i odżywiania. spoczynkowy wskaźnik metaboliczny mierzono za pomocą pośredniej kalorymetrii 17 po tym, jak spali przez osiem godzin w klinicznym ośrodku badawczym
[podobne: fizjoterapia po angielsku, jakie są choroby zakaźne, usg łódź prywatnie ]
[podobne: stopa konsko szpotawa, kawa inka w ciąży, hula hop efekty ]

0 thoughts on “Kliniczne spektrum otyłości i mutacji w genie receptora melanokortyny 4 ad”

  1. [..] odnosnik do informacji w naukowej publikacji odnosnie: chirurgia stomatologiczna poznań[…]